生化需氧量

对于生化需氧量的测定，得到普遍认可并主要使用的方法是稀释法。

稀释法中，使用氧饱和溶解的水稀释待测水样，之后使用一定量的微生物悬浊液（常用活性污泥）少量固定的接种物质接种，然后测试此时的溶解氧${\displaystyle {\begin{smallmatrix}DO_{1}\end{smallmatrix}}}$，密封水样。将温度保持在20℃，静置水样于黑暗环境中（以防止光合作用增加样本中溶解氧）。五天后，再测试此时水样的溶解氧${\displaystyle {\begin{smallmatrix}DO_{2}\end{smallmatrix}}}$[4]。

记稀释因子为${\displaystyle {\begin{smallmatrix}F\end{smallmatrix}}}$，接种液中的生化需氧量为${\displaystyle {\begin{smallmatrix}BOD_{seed}\end{smallmatrix}}}$，于是稀释接种法的计算公式为：

${\displaystyle BOD_{5}=\left(DO_{1}-DO_{2}-BOD_{seed}\right)\times F}$

若稀释法过程未经接种，则：${\displaystyle BOD_{5}=\left(DO_{1}-DO_{2}\right)\times F}$

若测试过程未经稀释，则：${\displaystyle BOD_{5}=DO_{1}-DO_{2}}$

在中国，环境保护部发布了《水质 五日生化需氧量（BOD5）的测定 稀释与接种法》（HJ 505-2009）[4]，作为目前的${\displaystyle {\begin{smallmatrix}BOD_{5}\end{smallmatrix}}}$测定标准。

为克服稀释法所具有的操作复杂、所需试剂较多、耗时较长、重现性差等缺点，人们还开发出一些其他的改进方法，如测压法、增温法、生物传感器法、活性污泥曝气降解法等，但是它们存在新的缺点，尚不能取代稀释法的地位。[5][6][7]

测压法：其原理是生化反应产生的二氧化碳被样品瓶中吸收剂吸收，而空气中的氧溶解到水中以补充消耗，从而密闭系统压力降低，根据气压降就可以求出水样中的BOD值。其优点在于操作简单、测定直接且实时，能连续显示结果；但是它并不能减少培养时间。

增温法：其原理是按照一定的经验增温培养时间，来提高反应温度，激化微生物活性，加速其分解作用从而达到快速测定。其缺点在于测定的精密度较差，仅适用于特定废水的控制分析。

生物传感器法：其原理是在此类传感器中，水样中溶解氧通过固定的微生物膜层扩散到电极上会显示出一定的电流，而发生生化反应后溶解氧大量减少，氧电极电流随之迅速减小，根据这一电流的减小值在事先标定的曲线上可得出${\displaystyle {\begin{smallmatrix}BOD_{5}\end{smallmatrix}}}$。其缺点在于传感器制作困难、生物膜寿命短，测定范围较窄。

活性污泥曝气降解法：其原理是利用活性污泥曝气降解水样一段时间，用重铬酸钾测定曝气前后COD，其变化即为总的生化需氧量，之后对照标准测定值即得出${\displaystyle {\begin{smallmatrix}BOD_{5}\end{smallmatrix}}}$。这一方法更适用于BOD和COD比值的测定。