LB培养基

LB培养基,LB),是微生物學實驗中最常用的營養性培養基,用於培養大腸桿菌細菌,分為液態培养基和加入瓊脂製成的固態培養基。加入抗生素的 LB 培養基可用於篩選以大腸杆菌爲宿主的選殖

一瓶LB液體培養基和一塊含有瓊脂的LB固體培養平板

名稱

儘管該培養基的名稱被廣泛解釋爲Luria-Bertani 培養基,然而根據其發明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法,這個名字來源於英語的 lysogeny broth,即溶菌肉湯[1]

配方

LB 培養基的配方發表於1951年有關溶源性的論文中。用於使志賀氏菌屬的細菌增長[1][2]

LB培養基在1950年代曾被用作培養大腸桿菌的業界標準配方[3][4][5][6][7]。它還被廣泛應用於分子微生物學以及質體DNA的製備上,是重組大腸桿菌DNA時最常用的培養基[8]。但LB培養基不鼓勵應用於生理學研究上[9]


每個LB培養基的配方不盡相同,但大概都會包含下列幾項:

一升水中加入:

  • 胰蛋白腖(Tryptone)10
  • 酵母粉(Yeast extract)5克
  • 氯化鈉10克
  • 維生素(包含維生素B群)
  • 微量元素(包含等等)
  • 礦物質

1951年的原始論文中,貝爾塔尼在1公升的水中加入了10克的氯化鈉、1克的葡萄糖[6],但之後便剔除掉了葡萄糖。


氯化鈉的量經常隨細菌的生長需求不同而有所改變,像鹽分較低的Lennox和Luria培養基就適用於對於鹽分較敏感的抗生素實驗上[10]

  • LB-Miller (10 g/L NaCl)
  • LB-Lennox (5 g/L NaCl)
  • LB-Luria (0.5 g/L NaCl)

製備方法

LB液體培養基

至1L并調pH值至7.0後高溫滅菌。如需要製成固態培養基,在調pH值後加入1.5%(质量体积比,即每升培养基中加入15克)的瓊脂再滅菌。

  • 將上述成分溶於800 ml的去離子水中。
  • 加入蒸餾水或去離子水至一公升。
  • 高壓釜以 121 °C 滅菌20分鐘。
  • 冷卻後即可使用

參見

參考文獻

  1. Giuseppe Bertani. . Journal of Bacteriology. 2004-02, 186 (3): 595–600 [2019-02-13]. ISSN 0021-9193. PMC 321500可免费查阅. PMID 14729683. doi:10.1128/JB.186.3.595-600.2004. (原始内容存档于2019-08-13).
  2. Bertani, G. (1951). Studies on lysogenesis. I. The mode of phage liberation by lysogenic Escherichia coli. J. Bacteriol. 62:293-300. PMID 14888646 PDF
  3. Miller, J. H. (1972). Experiments in molecular genetics. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York.
  4. Luria, S. E., J. N. Adams, and R. C. Ting. (1960). Transduction of lactose-utilizing ability among strain of E. coli and S. dysenteriae and the properties of the transducing phage particles. Virology. 12:348-390. PMID 13764402
  5. Lennox, E. S. (1955). Transduction of linked genetic characters of the host by bacteriophage P1. Virology. 1:190-206. PMID 13267987
  6. Luria, S. E., and J. W. Burrous. (1957). Hybridization between Escherichia coli and Shigella. J. Bacteriol. 74:461-476. PMID 13475269 PDF
  7. Anderson, E. H. (1946). Growth requirement of virus-resistant mutants of Escherichia coli strain B. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 32:120-128. PMID 16588724
  8. Sambrook, J., E. F. Fritsch, and T. Maniatis. (1989). Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd edition. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York.
  9. Nikaido, H. (2009). The Limitations of LB Medium. Small things considered - The Microbe Blog. ASM. http://schaechter.asmblog.org/schaechter/2009/11/the-limitations-of-lb-medium.html 页面存档备份,存于
  10. . Expression Technologies Inc. http://www.exptec.com/Reagents/Common%20Media.htm 页面存档备份,存于
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